题目：急性ITP患儿外周血CD4+CD25+Tr细胞及其与IL-18的相关性研究

特发性血小板减少性紫癜（ITP）为一种严重疾病，有研究表明ITP患者体内存在T淋巴细胞比例失调，预示着T细胞亚群的紊乱参与ITP的发生发展过程[1-2]。当前ITP发病机制的焦点集中于Th1/Th2细胞之间的失衡，细胞免疫功能紊乱和细胞因子与ITP的发病及临床进展有关，即以Th1漂移为主，IL-18是Thl类细胞因子，作为细胞炎性介质强有力的诱导者，通过刺激型反应，诱导严重的免疫紊乱，从而参与一些免疫疾病的发生发展，其能否促进或抑制Tr细胞的增殖尚未见报道。本研究对42例AITP患儿外周血中CD4+CD25+Tr细胞及IL-18水平进行了测定，旨在进一步探讨IL-18和CD4+CD25+Tr细胞在ITP发病过程中的作用及可能机制，为AITP的临床免疫调节治疗提供一定的理论依据和新的治疗途径。
　　1　资料与方法
　　1.1　一般资料　选择2009年1月-2010年12月在笔者所在医院门诊、住院部就诊的急性特发性血小板减少性紫癜患儿42例，其中男18例，女24例，年龄0.5~8岁，平均（5.46±2.25）岁，均符合ITP的诊断标准[3]。选取同期在本院体检科正常儿童42例作为对照组，患儿过往没有其他疾病病史，其中男16例，女26例，年龄3~9岁，平均（6.14±3.26）岁；两组年龄、性别等一般资料比较差异均无统计学意义（P>0.05），具有可比性。
　　1.2　研究方法
　　1.2.2　细胞因子IL-18检测　所有受检对象清晨空腹抽取静脉血5 ml，离心5 min，3000 r/min，血清分离后放-20 ℃冰箱保存备用。所有标本采集前3个月均未接受过成分血小板输注和任何免疫抑制剂。以酶联免疫吸附法（ELISA）定量检测血清IL-18水平，试剂盒由Biosource公司提供，严格按说明书中的步骤进行操作。
　　1.3　统计学处理　应用SPSS 16.0统计学软件对数据进行处理，计量资料以（x±s）表示，采用t检验，并对数据进行相关性分析，以P<0.05为差异有统计学意义。
　　3　讨论
　　ITP以患者体内抗血小板抗体增多，血小板破坏过多而出血为特点，发病机制复杂，可能涉及T细胞、B细胞、巨核细胞、细胞因子、转录因子等多因素错综复杂的关系，尤其是T细胞免疫在巨核细胞受抑和血小板破坏中发挥了关键性作用[4]。CD4+CD25+调节性T细胞是近年来发现的存在于正常人外周血和脾脏中一类特定亚群的CD4+T细胞，正常人外周血淋巴细胞中约占5％~10％，具有免疫无能性和免疫抑制性两大特性的调节性T细胞亚群，介导的抑制作用非常复杂，主要通过直接细胞接触途径、分泌抑制性细胞因子途径、间接抑制途径、细胞溶解途径、竞争性抑制途径这五大途径发挥抑制功能，能抑制自身反应性T、B细胞的活化和增殖及自身抗体的产生[5]。由于ITP患者存在自身反应性T细胞的异常活化，活化的CD4+T效应细胞表面也表达CD25分子，很难区分这两群功能不相同的细胞，因此，CD4+CD25+T细胞数量并不能代表真正的调节细胞水平[6]。Foxp3表面分子是脊椎动物叉头样转录因子的总称，特异性表达在CD4+CD25+调节性T细胞上，是CD4+CD25+调节性T细胞的一个特异性标志。Foxp3表达在CD4+CD25+调节性T细胞的发育和功能上起重要作用。Walker等[7]研究表明，CD4+CD25+调节性T细胞细胞的活化可导致CD4+CD25+调节性T细胞表达Foxp3增加，并与抑制活性有关。吕学文等[7]研究发现，ITP者外周血Tr数量减少，Foxp3 mRNA表达也减少，提示Foxp3可能通过翻译水平的改变调节Tr细胞抑制功能。CD4+CD25+调节性T细胞主要通过细胞-细胞直接接触作用和细胞因子发挥调节作用。IL-18是1996年正式命名的细胞因子，主要由单核巨噬细胞产生，是一种强有力的免疫调节因子，其结构与IL-1相似，功能与IL-12相似，但发挥作用却不依赖于两者。IL-18作为细胞炎性介质的诱导者，通过与其受体结合，不仅可诱导IL-2及TNF-α等细胞因子的产生，促进Th1类细胞的增殖、发育和分化，产生Th1型免疫应答，而且可通过增强NK细胞的细胞毒作用，直接诱导NK细胞或T细胞产生INF-γ，从而诱发严重的免疫紊乱。故深入研究IL-18在ITP患者中表达水平的变化，在用于探讨ITP发病机制及指导其治疗中有重要意义。
　　总之，急性ITP患儿外周血CD4+CD25+Foxp3+调节性性T细胞数量减少和II-18水平升高可能在AITP发病中起重要作用，两者共同通过加剧Thl/Th2失衡，机体的免疫调节功能异常从而导致ITP的发生。
　　参考文献
　　[1] Semple J W， Provan D， Garvey M B， et al. Recent progress in understanding the pathogenesis of immune thrombocytopenia[J].Curr Opin Hematol，2010，17（6）：590-595. [2] Park S H，Kim J Y，Kim S K，et al.Regulatory T-cells in systemic lupus erythemat-osus associated thrombocytopenia: a comparison with idiopathic thrombocytopenic purpura[J].Lupus，2010，19（7）：888-889.
　　[3] 张之南.血液病诊断及疗效标准[M].第2版.北京：科学出版社，1998:279-281.
　　[4] Nosotti M， Falleni M， Palleschi A， et al. Reaction detection of lymph node lung cancer micrometastasis using carcinoembryonic antigen marker[J].Chest，2005，128（3）：1539-1544.
　　[5] 凌云，曹祥山，余自强，等.CD4+CD25+调节性T细胞在特发性血小板减少性紫癜患者中的变化[J].中华血液学杂志，2007，28（3）：184-188.
　　[6] Sakaguchi S， Sakaguchi N， Shimizu J，et al.Immunologic tolerance maintained by CD4+CD25+ regulatory T cells: their common role in controlling autoimmunity， tumor immunity， and transplantation tolerance[J].Immunol Rev，2001，182（1）：18-32.
　　[7] Walker M R， Kasprowicz D J， Gersuk V H， et al.Induction of FoxP3 and acquisition of T regulatory activity by stimulated human CD4+CD25-T cells[J].J Clin Invest，2003，112（9）：1437-1443.
　　[8] 吕学文，刘仿，伍昌林，等.急性ITP患儿外周血CD4+CD25+T细胞及相关细胞因子的研究[J].临床检验杂志，2007，25（2）：104-106.
　　[9] 芮耀耀，张兰芳，钱小青，等.儿童特发性血小板减少性紫癜患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞水平的检测及其意义[J].江苏大学学报，2007，17（4）：340-343.
　　[10] 常大雨，周荣富，欧阳建.特发性血小板减少性紫癜的发病机制研究进展[J].血栓与止血学，2009，15（1）：36-39. (责任编辑：南粤论文中心)转贴于南粤论文中心: http://www.nylw.net(南粤论文中心__代写代发论文_毕业论文带写_广州职称论文代发_广州论文网）