表1 8 w时两组大鼠OGTT试验各时间点血糖浓度（略）(相关蛋白及c?myc、c?fos mRNA在糖尿病大鼠心肌细胞中表达的研究 )
与对照组比较：1）P＜0.05，下表同
表2 8 w时两组大鼠体重和葡萄糖钳夹试验GIR（略）
表3 8 w时两组大鼠FINS、FPG和ISI（略）
表4 糖尿病组注射STZ与糖尿病组未注射STZ 3 d后FPG水平（略）
表5 14 w时两组大鼠FPG水平（略）(相关蛋白及c?myc、c?fos mRNA在糖尿病大鼠心肌细胞中表达的研究 )
2.3 糖尿病状态下心肌细胞c?myc、c?fos mRNA的表达 见图1～图3。以GAPDH作为内参照，c?myc mRNA的相对表达量在208 bp处可见明显条带，密度扫描对照组为0.390 9±0.112 9，糖尿病组为0.381 6±0.044 8，两组无显著性差异。 c?fos mRNA的相对表达量在439 bp处可见明显条带，密度扫描对照组为0.509 6 ±0.125 4，糖尿病组为0.395 2±0.067 4，组间比较有统计学差异（P＜0.05）。
图1 28 s和18 s RNA的RT?PCR分析（略）
图2 RT?PCR 14 w时糖尿病状态下c?myc mRNA的变化（略）
图3 RT?PCR 14 w时糖尿病状态下c?fos mRNA的变化（略）
图4 Western印迹法14 w时糖尿病状态下c?myc蛋白表达的变化（略）
图5 Western 印迹法14 w时糖尿病状态下c?fos蛋白表达的变化（略）
2.4 糖尿病状态下心肌细胞c?myc、c?fos蛋白的表达 c?myc蛋白的相对表达量 Western结果显示27 kD处有一个条带，密度扫描正常对照组为0.391±0.113，糖尿病组为0.382±0.045，两组无显著性差异。c?fos蛋白的相对表达量 Western结果显示40 kD处有一个条带，密度扫描对照组为0.510±0.125，糖尿病组为0.395±0.067（P＜0.05）。
3 讨论
(相关蛋白及c?myc、c?fos mRNA在糖尿病大鼠心肌细胞中表达的研究 )
糖尿病大鼠胰岛素受体浓度增加，胰岛素活化的受体酪氨酸磷酸化增加，尽管IRS?1的浓度减少，但是IRS?1酪氨酸磷酸化增加，从而使磷脂酰肌醇3磷酸激酶活性减弱。由于胰岛素抵抗使磷脂酰肌醇3磷酸激酶的活性处于下降通道，胰岛素活化的糖原合成明显减少。胰岛素活化的心肌c?fos mRNA水平增加，因此胰岛素信号通路的早期信号方向改变〔9〕。在新生的心肌细胞，胰岛素缺乏导致细胞凋亡，此效应与PI3激酶/Akt信号通路受损和bcl/bax比率降低有关，细胞内活性氧明显增加，导致线粒体DNA氧化受损，组成电子传递链的线粒体编码蛋白的表达受损〔10〕。核心2G1cNAc转移酶（core2 G1cNAc?T）是O?连接多聚糖生物合成途径的调节酶，在糖尿病动物心肌中明显增高，并受高糖和胰岛素的调节。过度表达core2 G1cNAc?T的转基因大鼠表现出明显的心肌肥厚，唾液酸O?聚糖增加，c?fos基因表达增加，AP?1活性增加，均为心脏应激的特征〔11〕。 在高糖刺激下，糖化血清白蛋白（GSA）平行诱导激活平滑肌细胞（VSMCs）的氧化还原反应转录因子（核因子?κВ）和AP?1，并增加MAPKs、细胞外信号调节蛋白（ERK）、p38MAPK的活性。GSA能够明显刺激VSMCs的增殖和迁移，引起血管壁炎症介导因子的产生，导致VSMCs 的增殖和迁移〔12〕。因此，糖尿病心肌病变自始至终存在着基因水平的表达异常，尤其是心肌细胞凋亡，细胞凋亡是由基因调控的主动死亡过程，具有独特的形态结构、生化和细胞分子生物学特征，在糖尿病心肌病变和心脏重构过程中起重要作用，是多基因多因素影响的结果。但目前糖尿病心肌病变中，c?myc、c?fos mRNA及蛋白在糖尿病心肌中的表达的报道较少。肿瘤坏死因子α（TNFα）激活MAPK，使bax表达上调，bcl?2表达下调，引起细胞凋亡；TNFα促进c?fos、c?myc表达，使心肌产生收缩功能不良的胚胎型同工蛋白，心肌间质胶原纤维沉积和心肌间质纤维化。
(相关蛋白及c?myc、c?fos mRNA在糖尿病大鼠心肌细胞中表达的研究 )
本研究发现，在糖尿病心肌中，诱导凋亡的基因c?myc mRNA及蛋白表达水平无明显变化，具有促进分化和诱导凋亡双重作用的c?fos mRNA及蛋白表达水平下降。c?fos mRNA及蛋白表达与其他研究结果不同，多数研究为表达增高，提示c?fos mRNA及蛋白表达可能在糖尿病心肌病变的发生发展过程中存在时相性的特点，尚有待进一步深入研究。
综上，c?myc、c?fos mRNA及蛋白表达在糖尿病心肌病变的发生发展过程中可能存在时相性的特点，c?fos mRNA及其蛋白在糖尿病心肌病变的分子水平信号通路中异常表达，可能与糖尿病心肌病的发生发展相关。
【参考文献】(相关蛋白及c?myc、c?fos mRNA在糖尿病大鼠心肌细胞中表达的研究 )
1 Rubler S，Dlugash J，Yuceoglu YZ.New type of cardiomyopathy associated with diabetic glomerulosclerosis〔J〕.Am J Cardiol，1972；30：595?602.(责任编辑：南粤论文中心)
